一、操作步驟
1、準(zhǔn)備工作
確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔，實(shí)驗(yàn)臺(tái)面整潔有序。準(zhǔn)備好所需的固相萃取柱、樣品、試劑、過(guò)濾設(shè)備等。 戴上實(shí)驗(yàn)手套和安全眼鏡，保障操作安全。
2、樣品預(yù)處理
將待處理樣品溶解在合適的溶劑中，根據(jù)樣品性質(zhì)選擇溶劑，如水溶性樣品可選擇水或緩沖溶液，有機(jī)樣品可用有機(jī)溶劑。
進(jìn)行過(guò)濾操作，可使用濾膜過(guò)濾，目的是去除樣品中的固體雜質(zhì)，確保樣品溶液濃度適中，避免過(guò)濃或過(guò)稀影響后續(xù)萃取效果。
3、裝填與平衡
將固相萃取柱垂直放置在支架上。
用適當(dāng)?shù)娜軇?duì)柱進(jìn)行平衡，對(duì)于C18柱等反相柱，常用甲醇進(jìn)行預(yù)處理，甲醇能濕潤(rùn)吸附劑表面并滲透鍵合烷基相，使硅膠表面更易被潤(rùn)濕；正相柱則用樣品所在有機(jī)溶劑預(yù)處理；離子交換柱根據(jù)樣品基質(zhì)是極性或非極性溶劑采用相應(yīng)溶劑預(yù)處理，且要讓大約1ml的預(yù)處理溶劑留在管過(guò)濾片上以保持填料潤(rùn)濕。
4、樣品加載
緩慢地將預(yù)處理后的樣品溶液加入到萃取柱頂部，使樣品在固相填料中均勻分布。如果加入速度過(guò)快，樣品可能分布不均，導(dǎo)致部分填料未能與樣品充分接觸。
5、沖洗填料
若分析物保留在填料上，先用不能洗脫目標(biāo)化合物的溶液沖洗，去除雜質(zhì)。然后用比樣品基質(zhì)強(qiáng)度高但又不至于洗脫分析物的溶劑沖洗，例如對(duì)于弱酸性分析物，可以先用低pH值溶液沖洗雜質(zhì)，再用適宜洗脫液洗脫。
6、洗脫
用少量能洗脫分析物的溶液沖洗填料，洗脫液在填料上停留適當(dāng)時(shí)間，分多次少量洗脫比一次大體積洗脫效果更好。
7、收集洗脫液
將洗脫液收集到試管或燒瓶中，注意避免交叉污染。
8、再生、清洗和存儲(chǔ)
根據(jù)需要，使用適當(dāng)再生溶劑將殘留雜質(zhì)和化合物洗脫，清洗后把萃取柱存放在干燥、避光處。
9、記錄數(shù)據(jù)
記錄樣品處理、使用情況和實(shí)驗(yàn)結(jié)果等數(shù)據(jù)，便于結(jié)果分析和實(shí)驗(yàn)復(fù)現(xiàn)。
二、使用技巧
流速控制方面，如重力法使用時(shí)流速宜慢，讓樣品與填料充分作用。
在選擇萃取柱時(shí)，要根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的柱類(lèi)型，像弱陰離子和酸性樣品可選柱。
盡量避免復(fù)雜的洗脫程序，以簡(jiǎn)單有效為原則。
為了確保結(jié)果可靠，固相萃取柱應(yīng)使用一次。
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